Kobayakawa Sena ist ein kleiner Junge, der in der Schule immer von den Rüpeln gehänselt wird. Seit der Grundschule spielt er immer die Rolle des "Laufburschen", so dass er schnell und flink in seinen Bewegungen geworden ist. Zufällig sind Hiruma Youichi und Kurita Ryukan auf der Suche nach einem schnellen Running Back für ihr American-Football-Team (Amefuto) und wollen Sena in das Team aufnehmen. Um ihren neuen 'Star'-Spieler vor den Augen der anderen High Schools zu verstecken, kleidet Hiruma Sena in einen Amefuto-Helm mit dunklem Visier und nennt ihn Eyeshield #21.